AmpliSeq for Illumina Focus Panel je riešenie pre cielené resekvenovanie vybraných kľúčových biomarkerov 52 génov so známym významom pre solídne nádory, ako napr. nádory pľúc, hrubého čreva, vaječníkov, prostaty, prsníka a melanómu. Pomocou tohto panelu je možné analyzovať DNA aj RNA súčasne. Rýchlo a efektívne je možné detegovať nukleotidové varianty - SNV („single nucleotide variants“), inzercie, delécie a CNV („copy number variants“) vo vzorkách DNA a fúzie génov vo vzorkách RNA.
Protokol zahŕňa prípravu knižnice na báze PCR, sekvenovanie špeciálnou Illumina SBS („sequencing by synthesis“) technológiou a automatickú analýzu dát. Výsledné dáta je možné analyzovať lokálne pomocou softvéru Local Run Manager alebo cloudovo pomocou platformy BaseSpace Sequence Hub, ktorá poskytuje prístup k BaseSpace Variant Interpreter.
Základné špecifikácie k AmpliSeq for Illumina Focus panelu:
Sekvenačný kit |
Počet vozriek/ experiment |
Doba sekvenovania |
Minimálna hĺbka pokrytia |
Dĺžka čítania |
iSeq 100 Reagent kit |
8 |
17 hod. |
500x |
2x150 bp |
MiniSeq Mid-output kit |
16 |
17 hod. |
500x |
2x150 bp |
MiniSeq High-output kit |
48 |
24 hod. |
500x |
2x150 bp |
MiSeq v2 Micro kit |
8 |
19 hod. |
500x |
2x150 bp |
MiSeq v2 kit |
30 |
24 hod. |
500x |
2x150 bp |
MiSeq v3 kit |
48 |
32 hod. |
500x |
2x150 bp |
Zoznam génov zachytávaných pomocou AmpliSeq for Illumina Focus panelu:
DNA pool
AKT1 |
EGFR |
FGFR4 |
JAK3 |
MYCN |
ALK |
ERBB2 |
GNA11 |
KIT |
NRAS |
AR |
ERBB3 |
GNAQ |
KRAS |
PDGFRA |
BRAF |
ERBB4 |
HRAS |
MAP2K1 |
PIK3CA |
CCND1 |
ESR1 |
IDH1 |
MAP2K2 |
RAF1 |
CDK4 |
FGFR1 |
IDH2 |
MET |
RET |
CDK6 |
FGFR2 |
JAK1 |
MTOR |
ROS1 |
CTNNB1 |
FGFR3 |
JAK2 |
MYC |
SMO |
DDR2 |
|
|
|
|
RNA pool
ABL1 |
EGFR |
ETV5 |
NTRK1 |
PPARG |
ALK |
ERBB2 |
FGFR1 |
NTRK2 |
RAF1 |
AKT3 |
ERG |
FGFR2 |
NTRK3 |
RET |
AXL |
ETV1 |
FGFR3 |
PDGFRA |
ROS1 |
BRAF |
ETV4 |
MET |
|
|